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詳細介紹
SYTOX 綠色死細胞核酸染料( Ex/Em: 502/525 nm, bound to DNA)是一種可輕易穿過受損細胞質膜而不能透過活細胞質膜的綠色核酸染料,其在于核酸結合之后熒光強度會得到超過 500 倍的顯著增強。SYTOX 綠色死細胞核酸染料可以用于染死的真核細胞的 RNA 和 DNA,在革蘭氏細菌中同樣也適用。使用者可以利用氬激光激發器的488nm(或者其他任何帶有450-490nm 激發光源的激發器)激發染料。SYTOX 綠色死細胞核酸染料可用于多色熒光分析,在不同的實驗應用中染固定細胞的核酸,如:熒光顯微鏡、熒光酶標儀,流式細胞儀上。
細胞制備與染色
1.使用塑料試管稀釋 SYTOX 綠色死細胞核酸染料,因為稀釋的染色液有可能會附著在玻璃上。一般情況下,如果希望得到最佳的染色效果的話,所用的緩沖液中最好不要含有磷酸鹽成分。實驗中配制其他所用試劑的時候,注意塑料管壁或玻璃管壁上不要殘留去污劑,盡量清洗干凈,否則即使沒有細胞也會造成強的背景和非特異性染色吸附。所用染料的濃度可以參考表格 1.
注意:多種因素可能影響你的染色效果,如:培養基、細胞密度、細胞類型等等。
| 表 1. 建議的染色條件. | ||
| 細胞類型 | 染色濃度 | 染色條件 |
| 細菌 | 0.5–5 µM | Incubate for >5 minutes. |
| 酵母 | 1–50 µM | Incubate for >10 minutes |
| 真核細胞 | 10 nM~50µM | Incubate for >10 minutes |
2.離心收集細胞,合適緩沖液或水(染色液中不能含有高濃度的一價或二價陽離子,會降低染色效果)重懸細胞。貼壁細胞如哺乳動物細胞可以進行爬片原位染色,直接用合適的染色濃度染色(見表 1),推薦進行預實驗,設置染色濃度梯度,根據實際應用優化實驗條件。
3.采用合適的熒光檢測儀進行觀察檢測。
注意事項:
本產品僅限科研用途。
為了您的健康,實驗時請佩戴一次性手套
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